重组大肠杆菌及其在全细胞转化合成阿斯巴甜中的应用

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重组大肠杆菌及其在全细胞转化合成阿斯巴甜中的应用

本发明公开了一种重组大肠杆菌及其在全细胞转化合成阿斯巴甜中的应用,本发明使用大肠杆菌表达含嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus thermoproteolyticus)来源的嗜热菌蛋白酶Npr及其同源突变体,其突变体Npr‑M4的全细胞催化体系酶活为16U/mL,较突变前提高了45%。后续利用大肠杆菌BL21表达Npr‑M4,并进行全细胞转化合成阿斯巴甜前体苄氧羰基阿斯巴甜,底物苄氧羰基天冬氨酸和苯丙氨酸甲酯的转化率为62%,最终得到的阿斯巴甜产率在95%以上,为工业化全细胞催化生产阿斯巴甜奠定了基础。
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